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                ELISA實驗方法之直接法
                瀏覽次數:50發布日期:2022-03-09

                ELISA實驗方法之直接法僅需要抗原和酶標一抗,操作簡便,可避免交叉反應,然而該方法要求酶標一抗有較高的特異性要求,同時也并非所有的一抗適合標記處理。直接法在實際運用中并不多見,它并不能對樣本中抗體進行定量分析,因為樣本中抗體是非酶標抗體,無法進行后續顯色實驗五大檢測方法中的直接法。


                首先,將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性IgM。

                操作步驟如下:

                ⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上,ELISA實驗方法之直接法形成固相抗人IgM。洗滌。


                ⑵加入稀釋的血清標本:保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。


                ⑶加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。


                ⑷加入針對特異性的酶標抗體:使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。


                ⑸加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,ELISA實驗方法之直接法是為陽性反應。

                實驗16.jpg


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